Enterotest 16
Mikrometóda, určujeme ňou biochemické vlastnosti v jamkách mikroplatničky. Jamky sú naplnené lyofilizovanými substrátmi pre jednotlivé vlastnosti. Jeden kmeň očkujeme súčasne do dvoch riadkov. V 2,5 ml sterilného fyziologického roztoku si pripravíme suspenziu 0,5 McF. Do jednotlivých jamiek testu dáme po 0,1 ml suspenzie a súčasne očkujeme aj kontrolu čistoty kmeňa – na MC. Niektoré testy prebiehajú bez prístupu vzduchu, takže povrch jamiek prevrstvíme sterilným
parafínovým olejom. Naočkované platne vložíme do igelitového vrecka a inkubujeme 37°C/ 20 hod. Hodnotíme farebné zmeny v jamkách. Vlastnosti určované enterotestom: skvasovanie 7 cukrov, tvorba sírovodíka, tvorba indolu, tvorba ureázy, spotrebovanie citrátu, produkcia dekarboxyláz – lyzín, ornitín.
 Serologické určovanie antigénnej štruktúry – sérotypizácia črevných patogénov Po určení biochemických vlastností je potrebné určiť aj antigénnu štruktúru črevných patogénov a to najmä Salmonelly. Salmonely majú veľké množstvo rôznych bičíkových a telových Ag. Podľa toho, ktorý Ag daný kmeň má ho zaraďujeme k jednotlivým tzv. sérotypom. Používame sadu králičích antisér, ktoré sú vysýtené tak, aby obsahovali len jeden daný typ protilátky.

7. Spracujte výter z konečníka na pevné a tekuté pôdy pri diagnóze
gastroenteritis. Popis základných morfologických, kultivačných a biochemických vlastností enteropatogénnych E. coli, Campylobacter a Helicobacter. Vykonajte spätnú aglutináciu E. coli a bližšiu identifikáciu rodov Campylobacter a Helicobacter.

 
Odber materiálu
Tampón rekta musí byť po odbere sfarbený od stolice. Mala by ho odoberať sestra, nie sám pacient. Vhodné je odoberať aj stolicu, baktérie lepšie prežívajú transport.

Kultivačné spracovanie
Kultivačne náročné, očkujeme KA, MC, DEZO. Tampón sa vloží do pomnožovacej pôdy – Selenitova pôda, potláča rast bežných črevných baktérií a podporuje rast črevných patogénov /Salmonela, Šigela, Yersínia/. Selenitova pôda sa po 24 hod. preočkuje na dve pôdy, na DEZO a na XLD agar (Wilson-Blair pôda). Súčasťou kultivácie je aj kultivácia na Campylobacter jejuni, pomocou špeciálnej pôdy, ktorá obsahuje ATB a niektoré rastové zložky. Kultivujeme ju 48 hod., očkujeme celú plochu, pri 42°C, zvyšeného CO2 a zvýšenej vlhkosti.

E. coli
Väčšina kmeňov je nepatogénnych, fyziologicky sa nachádza v dolných úsekoch tráviaceho traktu, kde tvorí významnú súčasť fyziologickej flóry, tvorí vitamín K, čiastočne vitamín B. 
Niektoré kmene E. coli vyvolávajú hnačkové ochorenia, väčšina môže vyvolávať mimočrevné ochorenia hnisavého charakteru. Spôsob prenosu všetkých črevných ochorení vyvolaných E.coli je fekálno – orálny.
1. EPEC – enteropatogénne E.coli - vyvolávajú hlavne dojčenské enteritídy (sérovary O26, O55, O111, O119, O125, O126 atď.). Príznaky: vracanie, hnačka, hlienovitá až vodnatá stolica, dehydratácia.
2. EIEC – enteroinvazívne E.coli – prenikajú do epitelu sliznice hrubého čreva, pôsobia podobne ako šigely. Sérovary O124, O143, O144.
3. ETEC – enterotoxické E.coli – kmene produkujú exotoxíny, termolabilný a termostabilný. Vyvolávajú hnačkové ochorenia, ktorých
závažnosť kolíše od miernych až po život ohrozujúce.
4. EHEC – enterohemoragické E.coli – viažu sa na bunky hrubého čreva, produkujú toxíny, verotoxíny. Vyvolávajú hemoragickú kolitídu až hemoragický uremický syndróm.

Diagnostika
- odoberáme stolicu, resp. tampón z rekta
- očkujeme: KA, ENDO, DC, pomnožovaciu pôdu – selenitovú, ktorú na druhý deň vyočkujeme na DC, Wilsonovu-Blairovu pôdu. (používame pôdy,
ktoré umožňujú záchyt väčšiny pôvodcov hnačkových ochorení)
- kmene E. coli vyrastajú na diagnostických pôdach ako laktóza pozitívne kolónie, na KA veľké sivasté kolónie, s hemolýzou, alebo bez
hemolýzy.
- kmene E. coli izolované od detí do 1 roka – aglutinujeme spätnou aglutináciou, či sa nejedná o EPEC.

Pripravíme si suspenziu vo fyziologickom roztoku (mliečna), dve kvapky suspenzie, pridáme králičie antiséra, polyvalentné A a B, zamiešame a pozorujeme aglutináciu, vyčírenie a drobné biele zhluky.
polyvalentné A – O26, O55, O111, O124
polyvalentné B – O86, O119, O125, O126, O128